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蓝色荧光的细胞检测技术-荧光分析显微镜
所属分类：显微镜百科 点击次数：168 发布日期：2022-06-20
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蓝色荧光的细胞检测技术-荧光分析显微镜 细胞活性检测技术 核酸染色技术 健康微型生物细胞的DNA集中在被称为类核体的区域。用核酸染料如DAPI处理后，在荧光显微镜下即可看到类核体。然而DAPI染色会产生非专一性的结果——和蛋白颗粒或细胞残体结合，所以经典的DAPI染色得到的结果普遍认为偏高。 实验室里维持在饥饿状态、没有类核体的细菌在被提供营养物质后，重新获得了黄色荧光的类核体，相应地，自然样品在添加营养后，近20％没有类核体的细菌又出现了类核体。这些结果显示，没有类核体的细胞可能仍活着，但所含的DNA可能处于一种相对松散的状态或其浓度不够以致于标准的DAPI染色无法出现阳性结果。 该技术的核心足除掉DAPI非专一性的染色，尤其是在盐度高于12 ppt时，DAPI最有可能与细菌表面结合，而不是穿过细胞膜和DNA结合(Zweifel&Hagstrom，1995)。将非专一性结合的DAPI去除，是利用2一丙醇(2一propan01)对DAPI染色的细菌进行洗涤。在去染色前一定要进行固定，因为这能使细胞膜变得具有刚性，更易于染色剂的进入。在模糊的蓝色荧光的细胞里，带有类核体的细胞看起来呈亮的黄点。
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