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扫描电子显微镜能观察细胞的三维空间结构
所属分类：显微镜百科 点击次数：156 发布日期：2022-06-20
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扫描电子显微镜能观察细胞的三维空间结构 扫描电镜观察 透射电镜仅能研究细胞的一个薄切面，扫描电镜则能观察细胞的三维空间结构，对研究细胞表面结构及染色体亚微结构都有用。 1．培养细胞的样品处理：生长于盖玻片上的细胞用Palade缓冲液或其它平衡盐清洗2～3次。培养瓶中的细胞用橡皮刮刮下，或单纯滴管吹打，也可用胰酶消化。但胰酶消化后，细胞表面结构有改变。收集细胞后用平衡盐洗涤。 2，沿管壁徐徐加入0，5呖戊二醛，约2～4m1，边加边摇，以防止细胞聚集成团，并置4℃固定半小时。 3．加筝渗磷酸盐缓冲液约10～15m1，洗涤，低速离心后弃去上清液。余下适量的细胞悬液。备用。 4．用等渗磷酸缓冲液配制的o．1g6多聚赖氨酸(分子量60，000～100，000)溶液滴在4mmX6mm大小洗净烘干的盖玻片上，室温下静置5～lomin，用滤纸从边缘吸去多余的液体。 ， 5．当盖玻片尚未完全千时，将上述备用的细胞悬液滴在涂有多聚赖氨酸阳离子膜的玻片上，静置5—30mia，用滤纸吸去多余的液体。 6，将附有细胞的玻片放入1呖戊二醛4℃固定山． 7，磷酸缓冲液从玻片边缘滴加，洗涤数次后，固定1h(4~C)。 8．磷酸缓冲液洗涤，梯度丙酮脱水，入醋酸异戊酌。待干燥处理
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