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酶反应最适温度一般为37℃-超微结构实验
所属分类:显微镜百科 点击次数:116 发布日期:2022-06-20
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酶反应最适温度一般为37℃-超微结构实验 孵育液要避免严重的高渗和低渗。配制孵育液时各物质要充分溶解。否则,各种成分的浓度会发生改变。溶解各种成分的顺序,一般按照已定的顺序进行。孵育反应适合于在振荡式恒温水浴箱中进行,孵育过程中不断振荡,使组织切片反应均匀完全,孵育液也易渗入组织内部中。没有振荡式恒温水浴箱时,在恒温水浴箱中人工振荡孵育液。酶反应最适温度一般为37℃,少数酶最适反应温度在20'C或高于37℃。孵育时间和温度要根据不同的酶和组织通过实验确定。反应结束后要用配制孵育液的缓冲液或其它合适缓冲液或生理盐水等漂洗组织,一般换洗2—3次,每次l一5min(以下简称漂洗)。可在0.05—0.1mol/L二甲胂酸钠缓冲液中短时保存(4℃)。漂洗的目的是去除组织中剩余的各种孵育液试剂,特别是多余的捕捉剂。一般酶反应漂洗后更好及时进行后固定,如那些最终反应产物为俄黑的酶反应,若不及时用织酸处理,反应产物会扩散或消退。少数酶反应:(如铅法、铈法等)可在缓冲液内保存过夜后再进行后固定。用饿酸后固定之前,对于那些反应前未充分固定(或未固定)的样品,可在酶反应后用2%戊二醛再固定1h,这时的固定不会影响酶的活性,却有利于超微结构的保存。
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