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DNA的Feulgen反应是显微镜下鉴别DNA的常规技术
所属分类:显微镜百科 点击次数:151 发布日期:2022-06-20
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DNA的Feulgen反应是显微镜下鉴别DNA的常规技术 核酸细胞化学 核酸细胞化学包括核酸的一般染色法、核酸的选择性染色法和DNA、RNA的专一性染色法等。尤其是后者,目前已发展成为基因的原位杂交方法,可对某个基因进行专一性的原位杂交定位 细胞核内一般核酸成分能显示,其中对可能起反应的基团通过乙酰化和氢硼化物还原预先加以封闭,可减少非特异性染色,而本来可染色的非酯化磷脂,由于在三氯化铟处理前的丙酮脱水和暴露于各种类脂溶剂而被抽提掉了。所以该法具一定的特异性,但透明角质颗粒、哺乳动物精子尾巴和肥大细胞颗粒也可染上。 DNA的Feulgen反应是光镜下鉴别DNA的常规方法,但在电镜下需把Feulgen和六亚甲四胺银染色结合才能使DNA选择性地显示。固定的组织切片在20℃下用5mol凡盐酸处理(富尔根水解),使DNA产生特异性水解而产生醛,用六亚甲四胺形成络合物的碱性银溶液测定醛基。这种方法的原理同糖类细胞化学中过碘酸—六亚甲四胺银染色法相仿。这一方法具较好的特异性,因为富尔根水解所产生的醛基是特异的,而省掉水解这一步就提供了很好的对照,以区别非特异性染色。该法中不能用四氧化织或丙烯醛作固定剂,因为这二类物质能引入可以和测定醛的试剂起反应的基团。
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