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单层生长的培养细胞使用的是球磨式匀浆器
所属分类:显微镜百科 点击次数:521 发布日期:2022-06-20
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单层生长的培养细胞使用的是球磨式匀浆器单层生长的培养细胞常常在等渗介质下使用紧密配置的Doun。e匀浆器(全玻璃材质)进行破裂,但使用频繁且对任何培养细胞效率都更高的则是球磨式匀浆器(细胞破碎机)或数次通过25号注射器针头的方法。球磨式匀浆器不仅在破碎细胞方面效率更高,同时还可以保护精细的细胞器如溶酶体一些悬浮培养细胞,特别是核质体积比很高的,比如淋巴细胞或Jurkat细胞,如果不先用相当低渗的介质进行溶胀的话,通常无论用什么方法都无法破碎。这就意味着很可能介质对于细胞器分离本身并不是像理想中那么适合的。该方法使用了低渗醋酸镁溶液,结合了将介质可能造成的有害效应降到最小的策略。细胞在大体积缓冲液中溶胀后,进行沉淀,在进行匀浆化之前除去大部分的液体。这样~来,等渗胞质溶胶的稀释保持在了最小限度,可以对释放出来的细胞器提供一定的保护。进一步的保护可通过立即加入高渗介质将匀浆液回复到等渗条件获得。这种方法可用于任何低渗介质的方案中。然而,通常情况下会退而求其次先沉淀细胞器再用等渗介质制成混悬液。
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