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显微镜花粉母细胞切面涂片实验技术常识
所属分类:显微镜百科 点击次数:200 发布日期:2022-06-20
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显微镜花粉母细胞切面涂片实验技术常识③涂片。 1.包埋处理和超薄切片 为了获得系列切面,需要将组织脱水后包埋在适宜的介质(石蜡)中以支撑材料防止材料在切片过程中变形。这对于观察不同发育阶段组织的连续变化、花药中减数分裂不同时期的花粉母细胞变异和体细胞中有丝分裂变化都是有用的。冲洗程序包括以下步骤: (1)冲洗固定后的组织在流水下完全冲洗24h(如果固定在金属离子固定剂中)以洗去固定液中所有成分。 脱水:组织经过30%、50%、70%、80%、90%、95%和100%等不同梯度系列的酒精中,每种浓度处理1h,最后在70%或纯酒精中过夜。 (2)透明 由于石蜡不与脱水的酒精相混,需要使用另一个媒介。用酒精脱水后,将组织采用酒精:氯仿梯度为3:1、1:1和1:3的混合液分别处理,每步1h,最后保存在纯氯仿溶液中lo~30rain。 (3)渗透将低熔点的石蜡小片放入含有样品组织的容器内,盖好保持37 C下48h。然后打开保持24h,放人45 C水浴锅中过夜,最后转到55~60 C的水浴锅中。当石蜡溶解时,样品组织随着石蜡的包埋而发生变化,最终将没有氯仿气味释放出来。
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