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握双向琼脂扩散实验的基本原理-生物显微镜
所属分类：显微镜百科 点击次数：197 发布日期：2022-06-20
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握双向琼脂扩散实验的基本原理-生物显微镜 可溶性抗原与相应抗体结合，在有适量电解质存在的条件下，形成肉眼可见的沉淀物，称为沉淀反应。根据抗原与抗体反应的环境条件及附加因素，沉淀反应可以分为环状沉淀、絮状沉淀和凝胶中的沉淀反应三种基本类型。 在凝胶中的沉淀反应，可根据抗原与抗体反应的方式和特性分为琼脂扩散、免疫电泳、对流免疫电泳(亦称反向免疫电泳或免疫电渗电泳)和火箭免疫电泳等。现介绍双向琼脂扩散实验。 [目的]初步掌握双向琼脂扩散实验的基本原理、方法、结果、分析及临床用途。 [材料]甲胎蛋白阳性血清(或脐带血)，甲胎蛋白免疫血清，优质琼脂粉，1％叠氮钠，吸管，载玻片，金属打孔器(外径3mm)，微量滴管。 [方法] 1。用生理盐水，制成2％琼脂凝胶(加叠氮钠至最后浓度为0．1％，防腐)。 ． 2．制备琼脂板取洁净载玻片置平台上，用吸管缓慢加溶化冷却至50～60℃琼脂于玻片上，每片约3．5ml，滴加时勿溢出玻片边缘，并避免产生气泡，冷却即成。 3．打孔用打孔器打呈三角形排列的三个孔，孔间距离为3ram。孔底补以少量琼脂。 4．加样在其中一孔滴加甲胎蛋白免疫血清，另二孔分别滴加不稀释及1：2稀释之甲胎蛋白。 5．温育加好样品的琼脂板置湿盒内，于37％温箱中静置24小时，观察抗原抗体产生的白色沉淀线。 [结果]如与待检标本产生沉淀线，该线与阳性对照所产生的沉淀线吻接成一线则表示阳性。如无沉淀线，或与阳性对照沉淀交叉，则表示阴性。
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