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常見的细胞培养问题—解决办法
所属分类：显微镜百科 点击次数：253 发布日期：2022-06-20
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常見的细胞培养问题
1. 解冻后观察:
1-1 镜检
(Microscopic)
1-1-1细胞數少
可能引起的原因
1. 解冻后若以離心方式去除
DMSO，部分细胞未有效沈
淀，细胞數将会减少。
解决方式
1. 考虑直接将解冻后的细胞悬
浮液加入含新鲜培养基中直
接培养，细胞贴附后，第二天
再更换培养基。
1-1-2存活率不佳
2. 有些细胞容易絮聚而沈积在2. 细 胞 解 冻 后 pipetting 5 至 7冷冻管底部，若吸取细胞悬浮次，混合均匀。液前没有充分混合均匀，则可能只吸到细胞數较少的上清液。
1-1-2-1
有 些 细 胞 本 身 冷 冻 后 存 活 率 不 解冻后先培养在 T25 flask。
佳或细胞數较少。
1-1-2-2
解冻后受 DMSO 毒害:
1. 细胞对 DMSO 的毒性较为敏 1. 解 冻 后 的 细 胞 必 须 立 刻 经 由
感，例如:HL-60 细胞。
2. 细胞解冻后，细胞悬浮液在冷 2. 先 将 所 有 实 验 材 料 准 备 齐全，培养基预热好再进行解冻管内时间拖太久。冻。
3. 解 冻 后 的 细 胞 悬 浮 液 种 至 3. 至少加入 10ml 以上的新鲜培养基或使 DMSO 浓度在 1 %(seeding) 含 新 鲜 培 养 基 的
flask 内 ， 但 由 于 培 养 基 量 太
少而不足以稀释 DMSO 的毒
性。
1-1-2-3
解冻前后受温度变化之伤害:
1. 收 到 本 所 寄 出 的 细 胞 后 没 有
马 上 解 冻 培 养 或 是 暂 存 在 -80
℃冰箱的时间太久。
離心方式去除 DMSO。
以下。
1. 收 到 细 胞 后 最 好 是 尽 速 解 冻
培养或暂存于-80℃冰箱，并于
翌日转移到液氮筒内。若暂存
1
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