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保定标题：倒置荧光显微镜直接计数总菌数-测量光学仪器
所属分类：新闻资讯 点击次数：299 发布日期：2026-04-21
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倒置荧光显微镜直接计数总菌数-测量光学仪器
传统的酵母菌计数以培养法需23天的时间，而直接显微镜计数法虽能
快速的计数，但无法准确区别死菌和活菌，使其应用性降低。
以活细胞核酸染剂(live cell nucleic acid stain)染色酵母菌和细菌，除了与菌体的的
DNA结合而使细胞核和粒线体在萤光显微镜下呈现黄色萤光之外，该染剂还
会使活菌的细胞质呈现绿色萤光，而死菌的细胞质呈现橙色萤光。
因此，一方面以直接显微镜计数总菌数，另一方面以直接萤光染色显微镜计数法求得
呈绿色萤光的活菌数比率，两者相乘即为估算活菌数，其结果与传统培养法
所得结果之相关系数酵母菌为0.91，细菌为0.96，并且只要30分钟即可完成估算活菌数。
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萤光产生的原理是萤光染剂受到
可见光或紫外光等较短波长具有较高能量的光激发，要回到稳定组态的能阶时，
会放出较长波长的萤光，非萤光物质则成为黑色背景。
一般萤光的波长要比吸收光的波长要长，且分子必需先吸收能量才能发散萤光。 运用萤光原理的
设备皆有一组萤光滤镜，包含两个镜片---激发光滤镜片及释放光滤镜片。
激发光滤镜片即利用特定滤镜片来激发特定波长范围的萤光染剂，免除不必要的萤光被激发。
而萤光染色技术除了提供观察单一细胞之形态与重要生理现象外，快速而且灵敏度也高