兴隆华侨农场标题:问下红血球的萤光染色用nile red是否合适!显微镜百科
所属分类:新闻资讯 点击次数:249 发布日期:2026-04-21
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关于红血球的萤光染色用nile red是否恰当
我的的染色步骤是先取3ul的血球溶到等渗透压的蔗糖水溶液内加以轻微晃动分散,
接着将nile red染剂2ul加入,一样轻微晃动5分钟使其均匀溷和,最后以离心置换蔗糖
水溶液的方式将多馀的染剂去除掉(清洗两次),再加入调整过导电度的等渗透压buffer
可是问题来了,经过离心清洗过后红血球变得相当难分散,在显微镜底下确认过都聚集
成一团一团的状况,想请教的问题是有可能是nile red的影响导致抗凝血剂失效吗,又
或是说抗凝血剂本身有问题?
北京上光仪器回复:
是用 EDTA tube (紫头管)吗? PBS 洗三次, EDTA 洗掉, 凝血因子也洗掉了还会 agglutination 大概是没洗乾淨 还有, 高浓度的 sucrose 会抑制 agglutinationFYI, 洗乾淨的 RBC, 室温一个礼拜都不会 agglutination. (没乾掉的话)
如果PBS洗完还是一堆 agglutination, 我猜是採血完没跟 EDTA mix 均匀
抽血, 确定马上抽完马上mix均匀

