使用荧光显微技术观察和测定细胞膜的光源特点
所属分类：新闻资讯 点击次数：13 发布日期：2026-04-20
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使用荧光显微技术观察和测定细胞膜的光源特点荧光技术在细胞膜研究上的应用荧光技术在细胞膜与膜蛋白的研究上主要有荧光共振能量转移(FRET-fluorescent resonance energy transfer)、荧光淬熄(fluorescence quenching)、光漂白荧光回复(FRAP -fluorescence recovery after photobleaching)与荧光显微技术(fluorescence microscopy technique)。FRET原理是一荧光物质(donor)受到特定波长的光线照射后会被激发而发出另一特定波长的光，此能量转移的距离约7-10 nm，在此距离内若有一接收者(acceptor)则此能量会被吸收，而荧光减弱。FRET广泛应用于膜蛋白的研究藉由donor与acceptor标识在欲观察的分子上，便可由荧光强弱知道两种分子结合与混合程度。Fluorescence quenching与FRET的原理类似，这类荧光分子在高浓度(~70mM)彼此距离接近时会发生分子之间会发生self-quenching的现象而让荧光减弱，而在低浓度时荧光较强。Fluorescence quenching经常被运用到微胞泄漏实验，当细胞膜上有破洞产生时，如果荧光分子外泄则浓度降低，因而造成荧光强度变化。FRAP的原理是在细胞膜的局部区域, 以激光光源集中激发局部区域, 让其造成分子局部的荧光漂白，再来测量荧光回复的速度而从回复的速度可以知道脂质分子扩散速率，进而了解细胞膜相变的机制相较于前面所提的荧光技术，荧光显微技术是一个能够直接、及时观察细胞膜上变化的技术。当人造膜上有两种区块共存时，被标识的荧光分子会选择停留在特定的区块而产生荧光分部不均匀，来提供足够的反差来观察人造膜上区块尺寸大小、形状与动态行为
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