将片子置于显微镜下观察染色结果
所属分类:新闻资讯 点击次数:10 发布日期:2026-04-20
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将片子置于显微镜下观察染色结果胞分佈,先将病理组织切片以 65℃烘烤 10 分钟,放入瓶 xylene 染色缸 10 分钟,转换置第二瓶 xylene 染色缸 10 分钟,除去包埋的石蜡,再将病理组织切片放入瓶 100%之无水酒精染色缸 3 分钟,转放入第二瓶100%之无水酒精染色缸 3 分钟,再放入 95%之酒精染色缸 3 分钟,接着放入 70%之酒精染色缸 3 分钟之后,再放入 5%之酒精染色缸 3 分钟,以自来水流水 5 分钟,将玻片放入含 1X 微波液之染色缸于加热器煮沸 30 分钟,等待冷却后,以 wash buffer (TBS,0.1% Tween 20 )清洗一次 5 分钟,使用 AEC Kit,将瓶(3% H2O2)加一滴在组织表面上,5 分钟,再以wash buffer 清洗 2 次,每次 5 分钟,加入 100μL 一级抗体 (稀释倍数 100倍),将玻片放入染色反应盒室温下 1 小时。再以 wash buffer 清洗 2 次,每次 5 分钟,加入第二瓶,第二级抗体一滴,将玻片放入染色反应盒室温下20 分钟,以 wash buffer 清洗 2 次,每次 5 分钟,加入第三瓶,呈色剂一滴,将玻片放入染色反应盒,呈色时间视颜色结果而定,若没有呈色则等 10 分钟为定,以二次纯水冲洗使呈色停止反应,再以 hematoxyline 染 10 秒钟,做对比染色 (counter stain),再以自来水浸泡 5 分钟,去除多馀之染色,放置室温自然晾乾 (air dry),加入一滴 Crystal mount 至玻片组织上抹平后晾乾,最后以阿拉伯胶 (Histomount)封片,将片子置于显微镜下观察染色结果
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