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光学显微观察细胞黏菌各时期的形态特征

所属分类:新闻资讯 点击次数:7 发布日期:2026-04-20

网站网友点击量更高的文献目录排行榜: 点此链接 0 研究过程与方法:1.采集地采集土壤,将采集土壤制成悬浮液静至约十分钟。2.将表层的悬浮液滴在已种有大肠杆菌的乳糖酵母抽出物培养基              (Lactose Yeast-Extract Agar),此步骤需在无菌操作台。3.培养基放至于25℃恒温培养箱中,三天后观察是否有细胞黏菌的孢子囊体或伪原生质体出现,若有发现则转移至新的培养基上培养。4.更换采集地点重複以上步骤。5.定时观察恒温培养箱中的培养基,以了解细胞黏菌的生活史。6.定时将已长出的细胞黏菌作转移。7.以解剖和光学显微观察细胞黏菌各时期的形态特征,及孢子之形状大小、极粒有无,孢子囊柄顶端和基部宽度。8.抽取其孢子进行DNA萃取及定序工作,比较亲缘关系。9.根据参考文献、序列辅助和专家指导来进行菌种鑑定一、采样〈一〉準备采集所需用具、铲子、笔、密封袋、相机〈二〉找寻腐植质丰富的土壤,且须在树荫下阴凉处〈三〉将落叶拨开,每个样区约1~3包(腐植质较丰富者挖较多)〈四〉注明采样地点、人、时间〈五〉若未立刻进行下一步实验,需将采样的土先冷藏   〈六〉采样时,选择天气良好的日子,且落叶多的腐植土二、培养基的调配   本实验采用乳糖酵母抽出物培养基(Lactose Yeast-Extract Agar)(Norberg,1971)〈1〉          以烧杯取1L的水,分别以电子秤秤出酵母萃取液【Yeast Extract】0.5g、乳糖1g,      加入烧杯中以小勺子搅拌。〈二〉将1L的溶液分装至準备好的五个锥形瓶中,每瓶约200ml〈三〉将洋菜【Agar】剪成小块,每小瓶秤3g加入,以刮杓拌匀,将剩馀的agar碎块装入密封的罐子内。〈四〉以锡箔纸将瓶口密封,放入高温高压灭菌器内进行灭菌。(121℃ 20min)〈五〉约1hr后将锥形瓶取出,移至无菌操作台,倒入培养皿。〈七〉经过一段时间冷却凝固后,以PARAFILM密封培养基,并装袋放入恒温箱三、细胞黏菌的分离〈一〉準备10数个小烧杯装入50ml的蒸馏水,以刮勺将样土挖出,每杯约5g的样土(二)静置等待约10分钟,至土皆沉淀,使其悬浮于液面(三)至无菌操作台,将培养基打开(四)将烧杯上层的液体,以玻璃滴管吸出,滴于培养基上,每个烧杯滴两个培养基(五)滴完后,注明人、时间、及样土代号,将培养基密封,并放回恒温箱中(六)数天后,将培养基以解剖显微镜观察,寻找是否有细胞黏菌,有的话便进行转移四、细胞黏菌的转移〈一〉在无菌操作台中,以解剖显微镜观察细胞黏菌〈二〉将针筒烧至红热之后置入酒精中冷却,迅速的在酒精灯上过火使酒精蒸发〈三〉将培养皿中生长的细胞黏菌子实体整株或孢子囊堆,以灭菌后的解剖针挑起,转植于新鲜的培养基〈四〉以PARAFILM封口,再置于25℃的恒温培养箱中培养 关注页面底部公众号,开通以下权限: 一、获得问题咨询权限。 二、获得工程师维修技术指导。 三、获得软件工程师在线指导 toupview,imageview,OLD-SG等软件技术支持。 四、请使用微信扫描首页底部官方账号!

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