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双光子激光扫描显微镜的优点
所属分类：显微镜百科 点击次数：662 发布日期：2022-05-08
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1、对样品的光漂白区域和光毒性小：
（1）光毒性小： 长波长的红外激光对细胞的光毒性小于短波长的激光， 例如对于Hochest3334z紫外荧光探针， 双光子可以不用紫外光激发。
（2）光漂白区域小： 荧光激发只发生在焦点处， 只有在焦平面上才有光漂白和光毒性
2、穿透力强：
（1）长波长的光比短波长的光受散射影响较小， 能量损失少， 容易穿透标本。
（2）双光子显微镜的穿透深度通常是共聚焦显微镜的2到3 倍。
显微镜下的生物成像
3、 成像的亮度和信噪比高：
（1） 双光子吸收只发生在焦点处， 所以双光子技术可以得到该点的大量信息， 包括 散射和漫反射的荧光都可以进入到检测器， 从而成像的亮度和信噪比高。
（2）单光子必须在检测器前使用针孔光栏来遮挡焦点以外的样品发出的荧光， 而且也遮挡了焦点处的散射和漫反射的荧光， 因此针孔光栏开的较小队 成像的亮度低， 开得较大时噪音信号增强， 信噪比下降。
4、 在—定波长范围内 ， 可获得连续的激发波长及激发光谱；
（1）波长范围为红外或近红外（700-1000nm）
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