显微镜中的分辨率怎么计算?
所属分类:显微镜百科 点击次数:4557 发布日期:2022-05-09
分辨率又称鉴别率,是衡量显微镜性能的一个重要参数。物镜的分辨率是指物镜能区分两个物点间的最小距离,用σ表示。
σ=0.61λ/NA
式中λ为所用光的波长
可见,波长愈短,分辨率愈高。数值孔径愈大,分辨率愈高。对于一定波长的入射光,物镜的分辨率完全取决于物镜的数值孔径;数值孔径越大,分辨率就越高。
提高分辨率的途径:
(1)降低波长λ A 值,使用短波光作光源。在使用可见光(如卤素灯或钨丝灯)作灯源时 ,可加蓝色滤光片以吸收长波的红、橙光,使波长接近于平均波长,以利镜检观察。紫外光显微镜是利用波长0.275 um的单色光作光源,从而使σ值减少为0.22um,分辨率高于可见光的两倍。电子显微镜是利用电子束作光源,电于束也具有波动性,它的波长更短,其σ值为几十个纳米。
(2)增大介质的 n 值和提高 NA 值,有效地降低σ值,从而提高分辨率。
(3)增大孔径角,但孔径半角更大也难达到90度,并且物镜在制造后,孔径角已经确定,因此,此项措施难以在观察时利用。
(4)增加明暗反差,观察时恰当地增加图像的明暗对比,也是提高清晰度的一项措施。可见,波长愈短,分辨率愈高。数值孔径愈大,分辨率愈高。对于一定波长的入射光,物镜的分辨率完全取决于物镜的数值孔径;数值孔径越大,分辨率就越高。
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