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采用悬浮培养细胞实验-培养皿用倒置显微镜
所属分类：显微镜百科 点击次数：144 发布日期：2022-06-20
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采用悬浮培养细胞实验-培养皿用倒置显微镜 在软琼脂上的克隆化生长 尽管单层培养克隆化可应用于从肿瘤直接培养的细胞，但近年的大多数报告均采用悬浮培养克隆化以减少具有贴壁依赖性的基质细胞的生长。克隆形成检测具有理论上的优点，即仅在具有很强的自我更新能力的细胞(可能是肿瘤细胞)中检测反应，而对增殖能力有限的细胞，它构成肿瘤的主体，则不检测。然而，这仅在细胞集落是真正的克隆的时候才行，并且仅在细胞克隆生长许多代以后才进行。遗憾的是，实际情况并非总是如此。克隆形成率通常为0．ol％一o．1％，它可能很难排除细胞团的出现。当单层克隆化细胞可获得10代(一1000个细胞)时，悬浮克隆通常在4—6代后(16—64个细胞)才可获得。假定其中的一些克隆从3—4个细胞的细胞团开始，那么，传代次数低到2次及细胞的自我更新能力就很值得怀疑。- 但是1在软琼脂上的生长确定是对细胞系有用的系统，它具有较高的接种率。但使用取自病人的实体瘤和渗出物进行实验则已碰到许多技术问题，它仃1影响对结果的解释。这些问题包括：较难从表皮瘤获得纯的细胞悬液(这是克隆化生长概念的先决条件)；接种率很低(《1％)；在某种生长条件下，贴壁依赖细胞形成克隆；需要大量的细胞；以及克隆计数上带有一定程度的主观性等。这些代表着现有技术的失败而并非检测方法的失败。已有作者强调过分离和选择适于不同类型肿瘤细胞的生长培养液的更佳方法的重要性
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