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GFP荧光和细胞活力分析图像显微镜的应用
所属分类：显微镜百科 点击次数：170 发布日期：2022-06-20
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GFP荧光和细胞活力分析图像显微镜的应用GFP荧光和细胞活力 采用GFP对细菌标记已成为一个普通的方法，然而一个棘手的问题却很少引起人们的注意，即GFP及其变种能否指示细胞活力。也就是，在显微镜下观察到的所有发出荧光的GFP标记细胞是否都可以认为是活细胞?Lowder等报告说，Pseudomonas刀uo-rescens的死亡细胞与GFP从细胞泄露之间存在很强的相关性。大多数死细胞(活力染色法)无GFP荧光，有小比例的细胞虽然死亡但仍具有绿色荧光[40]。我们将GFP标记S. enterica细胞经过高温、干燥或次氯酸钙等致死因素处理后也得到r相似的研究结果[41]。因此，GFP作为活细胞内稳定的荧光物质会因细菌细胞死亡而迅速消失。但是，因为少数荧光细胞的生理状态不清楚，所以在采用GFP标记法分析细胞活力时，更好是再采用另外一种方法来对结果进行确认。26.3.3.4细菌生理的其他荧光指示剂 尽管很多研究用荧光物质作为细菌呼吸或酶活性指示标记来研究水生环境下具有代谢活性的细菌的检测问题[42,43)，但这些荧光物质很少用于植物上细菌的活性研究。类似地，通过PH荧光探针【如5一(和6一)梭基荧光素、BCECF, SNAFL, SNARF] [42.43]的荧光比率成像和通过GFP[46]可以在单细胞水平上测定细菌的胞内pH，但是还不能对植物上细菌的pH进行原位测定。随着人们对鲜切果蔬上细菌酸胁迫存活的日益关注，类似研究手段将被证明是非常必要的。此外，在抗微生物研究中荧光探针结合流式细胞仪得到了1‘泛的应用。荧光探针技术和显微镜技术已成功用在去污染剂对植物上人和植物病原菌的定量影响研究中。
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