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分配层析和亲和分配在DNA纯化中的应用
所属分类：显微镜百科 点击次数：206 发布日期：2022-06-20
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分配层析和亲和分配在DNA纯化中的应用 染色体和核蛋白 二醇系统分离染色体脱氧核蛋白，通过单步分配获得了不同的非组蛋白／DNA比的核蛋白的部分分离。用逆流分配制作了脱氧核蛋白组分的谱线。 Pianev等(1979)研究了染色体的分配。用带电荷聚乙二醇(带负电S-PEG或带正电TMA-PEG)能将染色体从一相转移至另一相。发现了一定的选择性。 此操作的含义指的是将一相用另一相萃取多次，通过改变萃取相的组成就能有选择性地将混合物中不同组分一个接一个地萃取出来。在第四章中已讨论过的确定分配系数的各种不同因素，如离子组成、聚合物浓度、萃取相中聚合物分子量和温度等会引起分配系数改变，也可采用萃取相聚合物(一般为PEG)的电性如带电荷PEG或在PEG上接有疏水性及生物专一性基团来引起分配系数的变更。对膜蛋白的情况可用去污剂来完成上述作用。 细菌提取液的萃取曲线。大肠杆菌首先分配于含有高浓度NaCI的葡聚糖—聚乙二醇相系统，此时核酸分配于下相，而蛋白质则分配于上相。每用一新的萃取液时其中NaCl的含量是递减的，四步萃取后，用不含NaCI的上相，然后再用合适离子组成的上相来萃取DNA和高分子RNA。
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