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一般在用虫生真菌免疫抗血清的制备分析实验
所属分类:显微镜百科 点击次数:175 发布日期:2022-06-20
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一般在用虫生真菌免疫抗血清的制备分析实验 抗血清的制备 1.免疫动物实验室常用的免疫动物有家兔、山羊、豚鼠和鸡等。用于免疫的动物应适龄、健壮,无传染性疾患,更好为雄性。此外还需十分注意动物的饲养,以消除动物的个体差异以及在免疫过程中死亡的影响。若用兔时更好一组3只,兔的大小以2—3kg为宜。 2.免疫途径免疫途径多种多样,如静脉内、腹腔内、肌肉内、皮内、皮下、淋巴结内等,一般倾向于多途径免疫,但一次不应超过两种途径。途径的选择决定于抗原的生物学特性和理化特性,如分生孢子一类颗粒状抗原一般通过静脉途径。 3.免疫佐剂佐剂(adjuvant)又称免疫增强剂,是指与抗原同时注射或预先注射,能非特异性地增强或改变机体对抗原免疫反应的物质。佐剂能延长抗原在机体内的存留时间,并能增加抗原表面积,使抗原与淋巴系统细胞充分接触。常用的有福氏完全和不完全佐剂及明矾佐剂,其制备方法见张龙翔等。一般在用虫生真菌免疫时,由于抗原来源丰富很少用佐剂。 4.免疫程序(以球孢白僵菌为例) 选好2—3妇的健康雄性家兔,经耳缘静脉进行注射。白僵菌孢子注射浓度为107孢子/ml,注射6次;茵丝体清液的注射浓度为o.1~o.49湿菌体/ml,注射量约为1ml/kg体重,共免疫4次。免疫完成之后,先抽少量血测试抗体效价,效价达到试验要求后即可进行抽血。如效价不高还可继续加强免疫,直到达到要求为止。 测试效价时从耳静脉抽血或心脏采血1m1以上,用环状沉淀或琼脂双扩散方法测定效价。
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