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不同克隆载体接受外源DNA的程度各不相同
所属分类:显微镜百科 点击次数:185 发布日期:2022-06-20
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不同克隆载体接受外源DNA的程度各不相同 不同克隆载体接受外源DNA的能力各不相同,大小也有一定的限定范围。因此,大分子量的染色体基因组DNA分子,必须先片段化成适合于克隆的DNA片段群体。这样的DNA片段群体既可以通过机械切割,也可以用核酸限制性内切酶消化染色体基因组DNA获得适当大小的DNA片段。应用反转录酶从mRNA出发,也可以合成出不同大小的适于基因克隆的eDNA片段群体。这些DNA片段群体,在体外与选择好的载体(一般是质粒或噬菌体)连接后.,被导入大肠杆菌细胞。由于载体分子具有抗菌素抗性基因,所以只有那些获得了载体分子的细胞才能在含该抗生素的培养基上生长而形成一个菌落(或噬菌斑),即克隆。如此在细胞中扩增形成的DNA片段之集合,就是基因文库。
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