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细菌细胞壁散落在培养基计量图像生物显微镜
所属分类：显微镜百科 点击次数：127 发布日期：2022-06-20
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细菌细胞壁散落在培养基计量图像生物显微镜 吸去培养液，使细菌沉淀尽可能干燥。除去上清的简便方法是用一次性吸头与真空相连，用吸头接触液面，轻缓抽吸。当液体从管中吸出时，尽可能使吸头远离细菌沉淀，然后继续用吸头吸去附于管壁的液滴。 碱裂解提取 1．将细菌沉淀重悬于100μL，冰预冷的溶液I中，用旋涡混合器剧烈振荡。须使细菌在溶液I中完全分散，为此将两个微量离心管的底部互相接触并置于旋涡混合器上，同时进行振荡，可使沉淀迅速分散。对于有些菌株，细菌的细胞壁成分会散落在培养基中，这些成分可能抑制限制酶的活性，为此将细菌沉淀重悬于0．5mL STE溶液，离心，所得沉淀再如上所述重悬于100pI，冰预冷的溶液I中。 2．加入200t-L新配制的溶液Ⅱ。盖紧管口，快速颠倒离心管5次，以混合内容物。应确保离心管的整个内表面均与溶液Ⅱ接触。不要振荡，将离心管放置于冰上。 3．加入150tm用冰预冷的溶液Ⅲ。盖紧管口，将小离心管倒置后温和地振荡10s使溶液Ⅲ在粘稠的细菌裂解物中分散均匀，之后将离心管置于冰上3～5min。 4．微量离心机于4℃以15000r／rain离心5min，将上清液转移到另一离心管中。
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