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微生物学入门实验教学分析图像显微镜
所属分类：显微镜百科 点击次数：133 发布日期：2022-06-20
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微生物学入门实验教学分析图像显微镜特殊染色方法 负染法(Negative Staining)当标本本身或其中一部分，比如荚膜，不吸收染料，那么就可以采用负染法。荚膜是一层包围在许多细菌表面的多糖物质，起到保护宿主的屏障作用。它同时也阻止了染色。在负染中，微生物周围背景充满染料，如墨汁或黑色素(ni—grosin)等酸性染料。染色结果并未使菌体本身着色，而使其在暗色背景下保持透亮。接着用简单染色或复合染色来显现出荚膜内的细胞。这样，典型的实验结果是暗背景，透亮荚膜，荚膜内是被结晶紫染成的紫色细胞或被亚甲基蓝染成的蓝色细胞。鞭毛染色 鞭毛是某些细菌特有的运动附属器，因太细，很难用光学显微镜观察。当需要研究鞭毛的存在和分布时，就要用费力的鞭毛染色(Flagellar stai—ning)，即用染料或银等金属覆盖在鞭毛表面。这种技术操作困难且费时，所以在微生物学入门课程中常被省略。 芽孢染色 少数细菌种类能产生称为芽孢的抗性细胞。芽孢的细胞壁对普通染料有很强的阻挡作用，因此，经过简单染色，芽孢仍然是透明的，在细菌细胞中容易辨认。严格地讲，找一种芽孢染色法(Endo—spore staining)来观察芽孢并不是十分必要。然而，属在印度墨汁和结晶紫复染液形成的暗红色背景下，荚膜占据未被染色的透明区域，细胞本身被复染液染成了深紫色。图中细菌是成对排列的肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)(3，399×)于复合染色法的Schaeffer—Fulton芽孢染色法可以使芽孢更易观察。在热固定的涂片上覆盖孔雀绿染色液，然后温和加热直到出现蒸汽。冒蒸汽约5min就可以使孢子壁更易让染料透过。不过，现在更新型的染料使用时不需要加热到冒蒸汽。然后将载玻片浸在清水中漂洗30s除去细胞其他部位的染料，芽孢上染料被保留。再将番红复染液滴在载玻片上，对孢子外区域或营养细胞染色。无芽孢的细胞显红色；那些芽孢菌则是绿色芽孢和红色营养细胞。
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