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滴镜油,用油镜观察菌体的形态分析图像显微镜
所属分类：显微镜百科 点击次数：146 发布日期：2022-06-20
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滴镜油,用油镜观察菌体的形态分析图像显微镜细菌染色方法 革兰染色法 (1)玻片菌膜制法： ①涂片：取经脱脂并干燥(74 mm x 26 mm×1 mm)载玻片一块，加适量无菌生理盐水，取少许菌苔于其中研匀并涂成1 cm×2 cm的菌膜；液体培养物可直接涂片。 ②干燥：置室温或温箱或火焰上方助其干燥。 ③固定：将已干的菌膜在火焰上迅速来回通过3次(以不烤焦菌膜为度)，把菌烤死并固定在玻片上。 (2)革兰染色方法：向已固定好的菌膜滴加结晶紫染液染1分钟，水洗；加革兰碘液染≥1分钟，水洗；用95％乙醇脱色，至菌膜上无颜色脱下为止，水洗；然后加稀释石炭酸复红液染30秒至1分钟，水洗，待干。滴镜油，用油镜观察菌体的形态。 染色结果：革兰阳性菌为紫蓝色，革兰阴性菌为紫红色。 (3)注意事项： ④涂片不宜过厚，火焰固定时温度不宜过高。 ②应定期检查各种染色液质量，以免发生染色结果误差。 ③染色结果正确与否，除技术原因外，与菌龄和溶液pH值关系较大。幼龄菌或pH值较高易染成阳性，衰老菌或pH值较低易染成阴性结果。 2．单染色法在工作中，为了节约时间，对已知的革兰阳性或阴性菌，也可直接用一种染液(结晶紫或复红)染相应时间后，水洗、待干，镜检的做法。 3．芽胞染色法 (1)染色液： ①5％孔雀绿溶液。 ②稀释石炭酸复红(革兰第4染液)。 (2)玻片菌膜用火焰固定后，用孔雀绿染液(先盖2层新华1号滤纸以除杂质)56℃染30分钟，水洗；复红液染1分钟，水洗；自然干燥，油镜镜检。 (3)结果：芽胞呈紫蓝绿色，菌体呈红色。
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