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杆菌生长到高细胞密度-细菌培养显微镜
所属分类：显微镜百科 点击次数：137 发布日期：2022-06-20
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杆菌生长到高细胞密度-细菌培养显微镜 大肠杆菌 如果不需要翻译后的修饰，通常选择大肠杆菌作为初始宿主。大肠杆菌普及性的主要原因是人们对它有深厚的知识基础。我们对大肠杆菌生理和遗传学的理解可能要远超过其他任何生物。大肠杆菌有非常宽广的宿主背景(即特殊突变的组合)，以及种类丰富的载体和启动子。这种庞大的知识基础极大地便利了复杂的基因操作。背景明确的载体和启动子大大加快了合适生物催化剂的开发。 大肠杆菌有相对较高的生长速率，也能达到很高的细胞浓度(大于509干重／L)，并具借助于特殊的载体一启动子组合而可能具有很高的表达水平(约占总蛋白的25％～50％或更多)，这导致了极高的体积生产率。大肠杆菌也能在简单廉价的培养基上生长。所有这些因素给大肠杆菌带来了许多经济上的优势。 开发能使大肠杆菌生长到高细胞密度的策略是一项重要的技术贡献。乙酸和其他代谢副产物的积累能够显著抑制生长。通过控制葡萄糖的流加来阻止培养基中葡萄糖的大量积累可以阻止溢流代谢和乙酸形成。如果能够在线监测或预知葡萄糖消耗速率，可以将葡萄糖流加和其消耗速率偶联在一起进行流加控制。 但是，大肠杆菌并不是一种完美的宿主。主要问题在于大肠杆菌通常不分泌蛋白质。当蛋白质被保留在细胞内并达到一个很高的水平时，溶解的活性蛋白质的量通常不再增加，这是因为蛋白质的水解作用或形成了不溶解的包含体。
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