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细胞小培养皿直接置于体视显微镜下观察
所属分类：显微镜百科 点击次数：158 发布日期：2022-06-20
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细胞小培养皿直接置于体视显微镜下观察 一旦种植了原代细胞，细胞会处于一个高度营养的条件下，贴附到底物上，但是，绝大多数细胞会死亡或发生分化。培养2～3d后，增殖性细胞会离开组织培养皿底部，聚集成神经球样的细胞团，通常培养48h可以观察到。这些聚集的细胞团不应被误认为原代神经球。聚集细胞团块的数量直接与培养基中细胞碎片和死细胞数量有关。通常情况下，这些假神经球是很大的，但是它们是由小的、变黑的、形状不规则的细胞组成的。 pH诱导法 将相对接合型的两种纯系培养液各1 mL混合于小培养皿中，然后分别向混合培养液中加入新鲜配制的一定pH梯度的培养液2 mL。在20～25℃下培养。将小培养皿直接置于体视显微镜下观察。 测定培养温度，准确记录出现接合生殖相的pH值、接合生殖率更高时的pH值、接合生殖相不再出现时的pH值，寻找不同pH值下接合生殖率的变化规律，分析变化原因。通过计算接合生殖率找出诱导接合生殖的最适pH值。 每个组合设3个重复，需同学们协作完成。 温度诱导法 先通过智能恒温培养箱找出致死大草履虫的更高温度、更低温度，以确定大草履虫存活的温度范围。 将相对接合型的两种纯系培养液和新鲜培养液各l mL混合于小培养皿中，然后分别放入恒温培养箱中培养，在大草履虫存活的温度范围内，以1℃为梯度改变培养温度。2 h后，每隔10 min将小培养皿直接置于体视显微镜下观察，以判断是否出现接合生殖相。每个组合设3个重复。 测定培养液的pH值，准确记录开始出现接合生殖相的温度、接合生殖率更高时的温度、接合生殖相不再出现时的温度，寻找不同温度下接合生殖率的变化规律，分析变化原因。依据接合生殖率找出诱导接合生殖的最适温度。
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