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液相层析-利用酶溶解度的不同来分离酶
所属分类:显微镜百科 点击次数:114 发布日期:2022-06-20
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液相层析-利用酶溶解度的不同来分离酶 在液相层析中,静相也是液体,是某种液体固定在多孔的凝胶颗粒上。当酶溶液装进层析柱之后,动相的缓冲液开始洗脱,酶分子就以分配法则交流在两种液体之间,逐渐得以分离。一般静相用的是极性液体,动相用的是非极性液体,两者不得混溶。但也有静相用非极性液体,动相用极性液体的。由于表面张力的缘故,两者不会混溶在一起。 液相层析在本质上仍属于离子交换、亲和与吸附各种层析,只是静相改由液体担任,对于性质不稳定的蛋白质来说,液相层析更易于操作,利于分离。 一般说来,利用酶溶解度的不同来分离酶多用在提纯过程的最初阶段,柱层析或电泳多用在最后阶段。在最初阶段,杂七杂八的物质极多,量又大。到了最后阶段,酶已经快被提纯,量即变成很。 在提纯过程中,酶如果很快会分解,就必须设法赶快把酶提纯,这时快速的提纯法,如硫酸铵沉淀法就值得考虑。酶原料来源
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