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电融合技术的原理-细胞融合技术分析显微镜
所属分类：显微镜百科 点击次数：572 发布日期：2022-06-20
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电融合技术的原理-细胞融合技术分析显微镜 电融合技术的原理在于，悬于大小不同的两平行电极间伊低导电率溶液中的细胞，在1—100MHz和100—1000V/cm交流电场中，会向小电极移动，并极化成偶极子，而沿电场力向排列成串，此时再加上适当强度和持续时间的高压电脉冲，即可使相邻细胞膜的接触区产生可逆电击穿，从而触发细舱融合。 由了电融合技术具有融合率甚高，可达50—80%，以及可在显微镜下定向诱导细胞融合和可直接挑选杂种细胞等优点，因而正日益引起人们的重视。目前已有商品电融合器出售。为能在某些环节上进一步加以改进和发展，则可望具有十分诱人的应用前景。 杂种细胞的筛选：在上述融合条件下，并非所有的细胞都能融合。例如在以PEG作为融合剂时，大约只有十万分之一的细胞最终能够形成会增殖的杂种细胞。再加，细胞融合本身又带有一定的随机性，除不同亲本细胞间的融合外，还伴有各亲本细胞的自身融合。因此，在紧随细胞融合之后，即须设法把含有两亲本细胞染色体的杂种细胞分离或筛选出来。 通常面临的问题，则是须从大量快速增殖的亲本细胞中分离出少量生长缓慢的杂种细胞。最简便的办法无疑是应用选择培养基，使亲本细胞死亡，而仅让杂种细胞存活下来。为此，已先后利用亲本细胞的药物抗性、营养缺陷型和温度敏感性等遗传标记，建立了多种选择系统，并已成功地用于杂种细胞的筛选。此外，在融合前用人工标记亲本细胞，或以致死剂量的生化阻抑剂来处理亲本细胞，也是一种较为有效的筛选办法。、
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