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制备高品质的显微镜载玻片必须预先清洗
所属分类：显微镜百科 点击次数：163 发布日期：2022-06-20
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制备高品质的显微镜载玻片必须预先清洗制备 在制备巾期染色体铺片之前，高品质的显微镜载玻片必须预先清洗:用乙醉/乙醚(100:1)液冲洗和用不起毛的布或薄镜纸擦干。甲醉必须是新的(为铺片须购买小瓶装的和只用新瓶)。用在进行秋水仙胺处理同步化和用KCI低渗处理之后，从水浴中移去lOml的细胞培养物。按比例加人I.Oml新的甲醉和乙酸(3:1)固定剂到KCI细胞悬浮液中，然后倒71轻轻地混合这些物质。 离心之后(200g, 8分钟)，留下0.3m1，移去其余上清液。用手指或低速振荡使管中的物质轻轻地重新悬浮。在轻轻振荡的同时逐滴加人固定剂，接下来的3ml固定剂征5滴征5滴地加人。最后迅速加人4m1固定剂，同时倒置混合.总数为lOml的固定剂。在最后固定的水相中，红细胞应当溶解，证据就是细胞的混浊液变清。在室温培养溶液20分钟，然后按通常那样离心。 离心之后，留下0.3m1上清液，移去其余的上清液，轻轻振荡使沉淀物重新悬浮，加人lOml新的固定剂，同时振荡，头Sml按每次0.5ml的量加人，然后在室温继续培养细胞10分钟。该洗涤过程再重复两次以上。在最后一次洗涤之后，重新悬浮细胞沉淀，放人一个离心试骨中。如果在试竹中制备的细胞含有黑色凝块，其样品必须弃掉。白色凝块可以用巴氏吸管吸取。
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