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自动图像显微镜测出细菌总数和平均面积含量数量
所属分类:显微镜百科 点击次数:100 发布日期:2022-06-20
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自动图像显微镜测出细菌总数和平均面积含量数量直接测量法 与培养法不同,直接侧定法在侧试过程中不需要SRB生长,而是直接检测SR B的存在(包括SRB苗体的存在或SRB细胞所含化合物的存在)。 ①显微镜直接计数法一般认为显微镜只能测出系统细菌的总数,不能检出SRB的数级。用异硫佩酸盐荧光素(FITC)和间接荧光抗体技术(IFA)可定承检测细细菌总数和SRB含盆.它的原理是,FITC染料可粘附到任何蛋白质上,微生物经FITC处理后,在配有荧光的显微镜下,将染色细菌放大1 000或1 600倍就可观察,侧得细菌总数;而IFA间接荧光抗体只能在SRB上着色,在荧光显微镜上观察可得到SRB的数最.该方法的关键是染色剂的开发,它经实验室制成后,可冷藏保存,使用多年。 显微镜计数更大的特点是快速,但需特定的染料及受过培训的操作人员;由于该技术不能分辨细菌的死活,一些死菌体也被计人,故显微镜计数往往偏高。 ② ATP法三确酸腺昔(ATP)是所有活的生物细胞中都具有的一种化合物. ATP法通过侧定水样中ATP的含盆来检测水样中的生物总数。由于在油田污水注水系统中ATP主要来自于细苗(包括SRB),因此有人提出ATP法可用于油田污水注水水样检测包括SRB在内的细菌总数。 ATP法的基木方法是,先过滤水样去除其中的溶解性固体和盐类(它们可能干扰洲定试验),在过滤后的水样中加人一种试剂(如三经甲氨基甲烷)在一定条件下使细胞中的ATP释放出来,再加人一种特殊醉(荧光素酶)。这种醉能与ATP作用引起光化学反应,该反应所产生的光强是定量的,即每个ATP产生1个光单位。通过光度计测定光强,并查阅标准光强—菌最关系曲线,则可得到水样中的细苗总数。
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