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光学显微原理是使用使用光学透镜聚焦光束
所属分类:显微镜百科 点击次数:178 发布日期:2022-06-20
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电子显微镜术 与光学显微术相对照,前者是使用光学透镜聚焦光束,在电子显微术中,使用的电磁透镜(electromagnetic lenses)聚焦电子束。由于电子可被空气中的原子所吸收,所以标本应事先放置在管中,进行抽真空,即要求标本置于真空(vacuum)中。电子显微镜对生物物质的分辨率可达到0 .10nm 透射电子显微术是电子束直接穿透标本,透射电子((transmittedelec- trons)经电磁透镜聚焦成像,或照射到观测屏幕上,或照射到照相底片上。与标准的光学显微术相同,观察的是标本的薄切片。f 少寸于透射电子显微术,标本的切片要求更薄( 厚度:50一100nm)。由于电子均匀地穿透生物物质,使得未经染色的标本映像不清,因此标本应进行常规染色,这样可以分散某些不被电磁透镜聚焦的入射电子,也就不会成像。 为此,常使用重金属,例如金或饿,对生物物质进行染色。特别是常用四氧化锇(osmium tetroxide)对某些细胞成分,例如膜. 进行染色。得到黑色的映像。透射电子显微镜具有足够的高分辨率,可获得纯化的蛋白质,病毒及某些亚细胞器的形态信息。 抗体可用电子致密的金颗粒进行标记,犹如在免疫荧光显微术中用荧光化合物与样品薄切片中的专一目的蛋白相结合。当从电子显微镜观测时,映像中抗体分子已与它的抗原相结合的部位即可看到由于金颗粒显示出的黑色斑点,因此这一技术可用于确定特殊抗原的位置。
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