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普通光学显微镜下离体细胞是透明的需配置相衬装置
所属分类:显微镜百科 点击次数:151 发布日期:2022-06-20
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普通光学显微镜下离体细胞是透明的需配置相衬装置光学显微镜术 至此,所提及的那些技术只能应用于由固定剂杀死的细胞。它们作为有关组织培养贵料的来源无疑地是有价植的,但是,它们显然都不能达到研究活的动物细胞培养技术的主要目的。 在普通光学显微镜下离体细胞是透明的,实际上是看不见的,这一事实对早期组织培养工作者十分不利。那时详细研究活细胞可用的方法是暗视野照明,即应用一个特殊的台下聚光镜问接地照射标本,所以只有进人物镜的光才能被细胞散射, 因而在黑暗的背景下显出欣亮的是细胞部分。不过,对这种技术来说细胞生长容器的光学特性是很关键的,由于只有很少部分的光参与成像作用,因此除非显微镜配备照像闪光灯设备,否则需耍长期曝光才能拍成照片。 相差显微镜 1942年德国物理学家(Frits Zernicke)为显微镜学家解决。了观察活细胞的问题。他在研究天文望远镜的镜面时,发现了相差的理论,并认识到这一可应用于显微镜。 配备有相差的仪器时,人们很快地意识到这在组织培养实验室里几乎也是必不可少的 相差显微镜在活细胞研究上连续不断地作出了无数的成果。此外,由于物理学研究而发明了相差显微镜,也表明生物学的发展愈来愈依赖于基础科学的发展。 为了使皿微镜产生一个相差像,需要加人另一些组件,它们包括一个在台下聚光镜光栏中带有透明孔的黑盘和一个在物镜聚焦面背部有环状沟的“相差板”。 在物镜的后聚焦面形成一个在聚光钝下清晰的环状像,此像必须与相差板的环状沟相一致,简言之,与光通过密度小的区域相比,被标本的光学致密结构所反射的光减弱(即相消失)。 相差系统使这两类光相互作用,并把肉眼不能察觉的相差改变成眼睛能观察的波幅差。因此,使用通常类型的设备,细胞的致密结构在最后成像中看起来较深黑。
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