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动物细胞标本制备的步骤-光学分析常识
所属分类：显微镜百科 点击次数：186 发布日期：2022-06-20
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动物细胞标本制备的步骤-光学分析常识原生动物的活体染色 绝大多数的生物染料，对细胞都有较大的毒害作用，能用于活体染色的仅有少数几种。因而，生物活体染色的方法并不多。在原生动物上应用的活体染料，通常只有两种，即中性红和詹纳斯绿。 1.中性红活体染色中性红是一种专一的液泡系染色剂。而且，中性红的显色反应与PH值有密切关系，在酸性条件下显红色，在碱性条件下则显黄色。在原生动物上，用中性红染色，可以活体观察其体内食物泡的形成和消化的全过程。刚形成的食物泡，内含丰富的酸性水解酶，呈酸性，被中性红染成粉红色。当食物泡逐步被消化，由酸性向碱性转化时，中性红的显色反应便随之由红向黄变化，接近消化完了的食物泡呈棕黄色。一般在原生动物上使用的中性红染料，其浓度为万分之一。 中性红染液的配制方法有两种。一种是用蒸馏水配成0.1纬的母液，置暗处保存，使用时稀释10倍。另一种是用无水酒精配成0.1%的母液，置暗处保存，使用时稀释10倍。 在载玻片上滴上一滴浓集的原生动物，加上盖玻片。在盖玻片的一侧滴加一滴万分之一的中性红水溶液，然后在盖玻片的相对一侧用吸水纸条吸水，使中性红染液慢慢地渗入盖玻片内。立即置载玻片于显微镜下观察。另一种方法是，在载玻片上滴上一滴万分之一的中性红酒精溶液，待其干燥后，滴上一滴浓集的原生动物，加上盖玻片，即可置显微镜下观察。 2.詹纳斯绿活体染色詹纳斯绿是一种染线粒体的特异染料，可以用它活体显示原生动物细胞内的线粒体。一般使用詹纳斯绿配成万分之一的使用染液。注意詹纳斯绿对细胞仍有一点毒性，浓度掌握很关键，不可过高。詹纳斯绿的配制和使用方法同中性红完全一样。但是詹纳斯绿保存过久，将会降低或失去氧化能力，致使染色效果下降或染色失败。
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