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荧光显微镜观察标本染色的方式有哪些
所属分类：显微镜百科 点击次数：253 发布日期：2022-06-20
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荧光显微镜观察标本染色的方式有哪些 吖啶橙荧光染色法吖吮橙是一种荧光染料，与细胞核结合后，经激发产生出亮绿色的荧光。通常，除了一些未经固定容易变形、甚至破碎的原生动物，可经100^'200饿酸蒸气固定外，无须固定便可直接染色。用重蒸馏水配制1写的吖啶橙母液，置于暗处保存备用。使用浓度为万分之一，即取母液稀释100倍。在载玻片上滴上一滴浓集原生动物，再滴上一滴万分之一的吖啶橙染色液，加上盖玻片，立即置于荧光显微镜下观察，可见到细胞核发出深黄绿色的荧光。细胞质则呈现微弱的黄色一红色的荧光。时间一长，荧光会慢慢变弱至消失，故需抓紧时间观察。 PA-PI荧光染色法PAPI是一种特异性非常强的专染DNA的荧光染料，非常灵敏。用微吸管吸取一些原生动物置于梅氏蛋白的玻片上。尽量吸去水分，让原生动物虫体呈单层，平铺于载玻片上，注意不能令其干燥。待虫体快要开始干燥时，滴上一些卡诺氏固定液固定，并使虫体粘贴在载玻片上。固定时间约5分钟，之后，经蒸馏水洗2^-3次，洗脱固定液，空气干燥。滴加上0.5-1克/毫升浓度的重蒸馏水配制的DAPI染色液，便可在荧光显微镜下观察。细胞核发出强烈的白色带微黄的荧光。由于DAPI是专门与DNA结合、形成复合物的染料，故原生动物发出荧光之处，便是DNA所在地。正因为如此，DAPI荧光染色法显示原生动物核较之其他荧光染色法优越，可以显现出细胞核内DNA量的变化和位置。对于研究其有性生殖，特别是纤毛虫的接合生殖过程中，核器的发育变化过程十分适合。同其他荧光染色一样，时间一长，DAPI的激发荧光也会逐渐变弱至消失，必须抓紧时间观察或拍照
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