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使用体视显微镜下吸除脂肪球滴以及胚移置
所属分类：显微镜百科 点击次数：291 发布日期：2022-06-20
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使用体视显微镜下吸除脂肪球滴胚冷冻保存及胚移置： 前述猪卵细胞质中富含脂肪球滴之生物特性，此亦限制猪胚冷冻发展，在冷冻过程此脂肪球滴易造成卵细胞骨架损伤，解冻后培养发育至囊胚阶段时其细胞数目较少，且细胞核DNA损伤亦较严重，因此在技术发展，一直集中思考如何去除(或摘除)猪胚内脂肪球滴，如将早期胚(如刚受精之原核胚)离心并配合显微操作，在显微镜下吸除脂肪球滴，经冷冻之猪胚移置后可生下活仔猪，养猪研究所郭有海先生早期研究虽未使用此方法处理冷冻猪胚，亦成功生下一头死产仔猪，惟脂肪球滴仍为猪胚冷冻成功与否及效率好坏之瓶颈。近10年来，以玻璃化法搭配微滴(千分之一毫升)或固态界面之极快速(每分钟可降20,000℃)冷冻技术开发，已突破脂肪球滴之限制，亦即不必宜除或离心处理脂肪球滴，且不必使用稳定细胞骨架之药物处理，不论取自活体的猪胚或体外成熟/受精的猪胚，在冷冻解冻及胚移置之后，均可成功出生且健康之仔猪。以固态界面配合快速降温之玻璃化法成功生下17头晶体外成熟/受精、冷冻保存及胚移置等处理之仔猪，其平均体重亦达1.4公斤。 基本上猪胚冷冻技术已达成熟可商业化利用之阶段，惟其后续仍须搭配胚移置技术，如冷冻者为原核至桑椹胚期的猪胚，则需配合外科手术将解冻猪胚移置至同期化受胚猪之输卵管内，至于囊胚或已孵化猪胚可移置在子宫角上端，此部分可结合深部受精技术，将胚移置至子宫角近输卵管之适当位置，如可克服此瓶颈，未来冷冻猪胚移置，可类似牛胚移置，由畜主自行操作，在场内自备液态氮桶，购买优良种猪胚回场存放及自行进行解冻及胚移置，将降低种猪横向转移时疾病传播风险。
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