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将片子置于显微镜下观察染色结果
所属分类：显微镜百科 点击次数：305 发布日期：2022-06-20
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将片子置于显微镜下观察染色结果胞分佈，先将病理组织切片以 65℃烘烤 10 分钟，放入瓶 xylene 染色缸 10 分钟，转换置第二瓶 xylene 染色缸 10 分钟，除去包埋的石蜡，再将病理组织切片放入瓶 100％之无水酒精染色缸 3 分钟，转放入第二瓶100％之无水酒精染色缸 3 分钟，再放入 95％之酒精染色缸 3 分钟，接着放入 70％之酒精染色缸 3 分钟之后，再放入 5％之酒精染色缸 3 分钟，以自来水流水 5 分钟，将玻片放入含 1X 微波液之染色缸于加热器煮沸 30 分钟，等待冷却后，以 wash buffer (TBS，0.1％ Tween 20 )清洗一次 5 分钟，使用 AEC Kit，将瓶(3％ H2O2)加一滴在组织表面上，5 分钟，再以wash buffer 清洗 2 次，每次 5 分钟，加入 100μL 一级抗体 (稀释倍数 100倍)，将玻片放入染色反应盒室温下 1 小时。再以 wash buffer 清洗 2 次，每次 5 分钟，加入第二瓶，第二级抗体一滴，将玻片放入染色反应盒室温下20 分钟，以 wash buffer 清洗 2 次，每次 5 分钟，加入第三瓶，呈色剂一滴，将玻片放入染色反应盒，呈色时间视颜色结果而定，若没有呈色则等 10 分钟为定，以二次纯水冲洗使呈色停止反应，再以 hematoxyline 染 10 秒钟，做对比染色 (counter stain)，再以自来水浸泡 5 分钟，去除多馀之染色，放置室温自然晾乾 (air dry)，加入一滴 Crystal mount 至玻片组织上抹平后晾乾，最后以阿拉伯胶 (Histomount)封片，将片子置于显微镜下观察染色结果
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