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细胞透明且带有光泽但不是圆形呈不规则形状

所属分类:显微镜百科 点击次数:197 发布日期:2022-06-20

网站网友点击量更高的文献目录排行榜: 点此链接 我目前所做的实验叫做''phagocytosis assay''首先取出腹腔与骨髓细胞,lyse掉红血球细胞,在以1xPBS wash,最后回溶于1 ml 1xPBS,取10 ul细胞+10 ul 0.4% trypan blue混均匀后,取10 ul滴于血球计数器去计算活细胞,我主要是要算macrophage和neutrophil,染了trypan blue后,在显微镜下以10x去算活细胞。本来实验室都是直接取10 ul滴于血球计数器去计算活细胞,但是我算出来的细胞都比别人少很多,所以后来改用染trypan blue去计算,不过算出来还是比别人少。为什么呢?我目前有几个问题1.细胞 染trypan blue后 ,活细胞呈现透明带有光泽且为圆形,对吗?2. 但是有些细胞虽然为透明且带有光泽,但不是圆形,呈不规则形状,请问这样的细胞是快死了还是被刺激所以呈现要吞噬的形状(我用的tip和1xPBS都是灭菌的),请问这样的细胞算活细胞吗?3. 有些细胞虽然为透明且带有光泽,但是比要算的细胞小一号有的更小,这是活细胞吗还是气泡?有的比要算的大,是活细胞吗?用cytometer数细胞时有几点要注意不知道你有没有做到?chamber边界问题、细胞液的稀释倍率、换算原细胞液的公式还有你是否有先把细胞打散成单一细胞,而不是有些细胞还聚在一团染trypan blue后活细胞是发光透明状,因活细胞细胞膜没有破裂,染剂进不去细胞,自然就染不到了你的实验步骤中提到用1x PBS回溶,是否有注意在最短时间内loading细胞液至chamber内呢,说不定是因为实验手法影响到细胞做实验有时也需要经验,多试几次,如果还是一样,可以考虑在别人进行实验时在一旁观摩,或者请实验室的其他人带者你一起做,一起找出错误 关注页面底部公众号,开通以下权限: 一、获得问题咨询权限。 二、获得工程师维修技术指导。 三、获得软件工程师在线指导 toupview,imageview,OLD-SG等软件技术支持。 四、请使用微信扫描首页底部官方账号!

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