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传统的微生物分离与鉴定方法简介！体视显微镜价格
所属分类：显微镜百科 点击次数：232 发布日期：2022-06-20
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微生物分离与鑑定，一直以来都是生物医学研究发展上相当重要的挑战。传统的分析鑑定方法，须经过耗时的分离、培养、观察、测试等程序。我们利用奈米金属粒子阵列，建构一个可快速鑑测生物样本的表面增强拉曼散射光谱系统。由于拉曼讯号以鑑定分子指纹，这套系统在蛋白质、酵素、DNA 等生物分子的结构与反应动态学研究都有许多应用。我们可利用增强拉曼光谱此项技术来鑑定不同的细菌。将细菌置放在奈米金属粒子阵列上，细菌细胞壁上紧贴在金属粒子表面上的分子所产生的拉曼光谱讯号就是我们采到的分子指纹。不同种细菌之间细胞壁的组成会有差异，因此我们会得到不同的增强拉曼讯号。首先我们以格兰氏阳性菌 (Gram-positive)、格兰氏阴性菌(Gram-negative) 和分枝杆菌 (mycobacteria) 三大类去量测其表面拉曼散射光谱 ( 图二 )。格兰氏染色法是常见的细菌鑑别染色法，利用不同细菌细胞壁对于染剂结晶紫滞留的差异性，可分成格兰氏阳性菌与阴性菌。格兰氏阳性菌之胞壁是由厚度约 20 至 80nm 的多层肽聚醣 (peptidoglycan) 组成。相较之下，格兰氏阴性菌则通常具有约 1-7nm 的较薄肽聚醣层，在肽聚醣层外包覆了外膜及脂多醣 (lipopolysaccharides, LPSs)，整体结构较为複杂。而分枝杆菌在许多生理特质上是异于一般细菌，其具有富含脂质的细胞壁又更为複杂，这使得分枝杆菌无法以一般格兰氏染色法染色，要使用特殊的染剂以染色。而观察其增强拉曼散射光谱，我们可以明显将其分成三组不同的光谱型态，并可对应其细胞壁组成的差异性。革兰氏阳性菌其细胞壁组成最为简单，主要由肽聚醣构成，其光谱表现出来的分子振动波峰 (peak) 最少 ; 阴性菌的细胞壁组成结构较多，包含肽聚醣及脂多醣的分子结构，其分子震动波峰则略有增加 ; 而分枝杆菌因其细胞壁结构最是複杂，光谱也显现出最多的分子振动波锋。而这样的技术也可用于细菌的即时抗药性反应实验，藉由药物破坏细菌外壳结构，立即在细菌的拉曼光谱上出现反应，而对药物有抗药性的细菌并不会有外壳结构的损害，细菌光谱旧维持不变，快速的反应出细菌对施加的药物有无抗药性，大大的缩减以往还需培养的时间
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