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培养基、试剂及生化鑑定试验的品管 !金相显微镜采购企业!
所属分类:显微镜百科 点击次数:171 发布日期:2022-06-20
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培养基、试剂及生化鑑定试验的品管 !金相显微镜采购企业!1、每批新配制的培养基,试剂及每次操作生化鑑定试验均应进行品管,一般约包括灭菌,生长试验及生化试验反应等项目。2、灭菌试验需取每批新配制的培养基孵育于 25℃及 37℃,依日常操作步骤将无菌接种液接种入无菌培养基或基质液可用以检测"环境性"污染。3、生长试验为将已知生长特性的菌种接种于新配制的培养基,分枝杆菌之品质控制确效试验4.1 试剂:(1)、培养基:用于培养分枝杆菌之培养基。(2)、品管菌株:a、近期分离出的 M. tuberculosis。b、标準菌株 H37Rv。(3)、其他材料:a、经高压灭菌过的痰(AFS 阴性)或人工痰。b、7H9 含 15%甘油液体培养基,PH 7.0。c、50 mL 塑胶尖底离心管。4.2 步骤:(1)、使用 3 mL 7H9 含 15%甘油液体培养基将标準菌株 H37Rv 做成悬浮液(A)并充分混合。(2)、备制大约 106 cells/mL 浓度悬浮液(B):将标準菌株 H37Rv 做成悬浮液(A)一滴一滴加入 1 mL 缓衝液直到有一点混浊为止。(3)、 将悬浮液(B)取 0.5 mL 加入 4.5 mL 含甘油的瓶子中做成 105 cells/mL浓度悬浮液,重覆上述步骤做成 104 cells/mL 浓度悬浮液及 103cells/mL 浓度悬浮液。(4)、 将 15 个小玻璃瓶分别标示 105 cells/mL、104 cells/mL、103 cells/mL,取各浓度悬浮液 0.3 mL 加至每个小玻璃瓶中,存放在-70℃备用。(5)、每次做品管时分别取不同浓度加入 2.7 mL 经高压灭菌过的痰液(AFS 阴性)或人工痰,10 倍稀释混合后取 0.1 mL 种于三管 L-J 斜面试管。(6)、培养于 35℃、5-10﹪CO2、 21 天
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