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如何试着去看PBS和DMEM是否污染？
所属分类：显微镜百科 点击次数：265 发布日期：2022-06-20
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我的问题是最近忽然间发生的...我养的细胞是乳癌细胞株MCF-7，使用DMEM/F12培养，本身不加抗生素，然而因为细胞株是Tet-off system，所以有在maintain中加入2μg/ml的Doxycycline（Dox）在实验起始时以PBS wash 而后分成有Dox与单纯以DMEM/F12无抗生素者培养，诱导目标蛋白表现...----以上是常态培养情形问题：我上次是有发现我实验起始后诱导到一半（全程应6天，但发生在第3天）细胞会长得很快，而后就死了，DMDM/F12都变成黄色的，但是是澄清的，细胞在盘底呈现一种白云状（就是形状很像一块一块的白云，但没有飘起来），如果去移动dish，这时细胞就会飘起来，使medium变成沙沙的，这时候因为移动dish镜检有晃到，medium就变成混浊的了。但是有含Dox的那一组则很正常（看起来）（那时我怀疑是自己一开始种太多，而抗生素会稍微影响细胞生长，诱导需6天，可能因此dish太满）于是我重新按照一样的方法再作一次，发现一模一样的事又发生了，心里很毛，所以重新解冻了，新的细胞我解冻看起来很正常，贴的很好，继代一次之后，我试着种较少细胞数，但隔天去看却发现细胞不对劲，我养的8盘DMDM/F12一样都变成黄色的（但是澄清），细胞在盘底再次呈现一种白云状，移动dish镜检有晃到，medium就变成混浊的了。镜检的时候看到的是有点雾雾的，只有少量细胞贴在上面。请问各位先进，这是代表什么种类的污染？是浆霉菌吗？或者有什么简易的方法可确定？另如何试着去看PBS和DMEM是否污染？回复：是水黴，PBS、DMEM、细胞培养箱都得检查清洗建议你不要去试了 可能有问题的通通扔掉直接重配medium 重新解冻细胞吧!
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