网站网友点击量更高的文献目录排行榜： 点此链接 地黄炮制前后其他药理活性之比较一、材料本研究制备之三批一五九蒸晒熟地黄重庆行生地沅方生地沅方九蒸晒熟地黄。二、实验方法1.抗肿瘤细胞生长活性本实验将探用两种癌细胞株（肝胞细胞Hep 3B，前列腺癌细胞PC 3）来评估其地黄炮制前、中、后各分画之抗癌活性。细胞数目将MTT以法来测定，同时为了区别是否为直接细胞毒性，将测定Lactate dehydrogenase (LDH)以兹区别。2.抗氧化、自由基清除活性DDPH为一稳定氮属自由基，其517 nm吸光值约为1.12。当测试成分具有自由基清除能力时，吸光值会明显地下降。而评估测试成分清除自由基能力的依据是30分钟内使吸光值517 nm降低0.20单位时其所需之浓度（IC 0.20）表示之。3.抗血小板凝集活性以EDTA 当抗凝血剂来制备富血小板血浆(Platelet-rich plasma, PRP)，以本实验室发表之方法来洗涤，并制成血小板悬浊液(platelet suspension)。在各种不同之引发剂（如ADP, collagen, thrombin, Platelet-activati​​ng factor），以混浊度法来测定血小板凝集之程度。4.纤维蛋白溶解作用上述之血浆加入地黄抽取物后，以凝血产生凝血后，观察血块溶解之时间，以判断是否可缩短纤溶时间。5.血管平滑肌之增生将自大鼠胸腔取出血管，剪碎培养，并以trypsin将细胞打下，进行续代培养到第三到第八代。地黄之抽取物在与血管平滑细胞存在下，以各种增生剂（10% FBS, PDGF, thrombin），经48 小时后，以MTT 法测定细胞数目。6.对骨髓造血系统之影响(1)血液学研究批一蒸晒之地黄抽出液以1g/kg及5g/kg 口服灌食ICR小鼠，每组各5 只，另取5 只只灌食0.5ml 生理食盐水做为对照。灌食后6、12、24 小时从尾静脉采血做涂抹片，经Wright 染色液染色后,以油镜观察，并计算嗜中性球、嗜酸性球、嗜碱性球与淋巴球之数值(2)股骨骨髓细胞学批一蒸晒之地黄抽出液以1g/kg及5g/kg 口服灌食ICR小鼠，每组各5 只，另取5只只灌食0.5ml 生理食盐水做为对照。灌食后12 小时，将ICR小鼠以dislocation方法安乐死，迅速取出股骨，其中之骨髓以冰过之Hank's BufferSolution(HSS)冲出，经离心(230xg 10mim)洗涤后，以0.5ml HSS 溶出，做成涂抹片，以冰醋酸固定处理，染色后用显微镜观察。7.对免疫系统之影响批、第二批及沅方九蒸晒地黄水抽出液，分别以25mg/kg与250mg/kg二种浓度注射于ICR小鼠腹腔，连续五天，每一浓度使用10 只ICR小鼠。实验前及地黄抽出液注射后第5天和第8天，所有ICR小鼠先由尾静脉采血，放置4℃使其凝固，经离心取上清液，保存于-70℃冰箱待测。以R&D 公司之Quantikine®M 测定ICR 小鼠注射地黄抽出液后血中Iinterleukin-4 及Interleukin-12 的变化。注射25mg/kg者每组取4只，250mg/kg者每组取5 只做测定。(1)Lymphoproliferation assay：动物安乐死后，在无菌箱取出脾脏细胞洗涤后，置于含10 %胎牛血清之RPMI 1640 培养液后，分注于培养皿。在37°C培养48小时后，加入3H thymidine，再经18小时后，收取细胞做放射性计数。(2)Total immunoglobulin assay：以ELISA Test Kit 测定。(3)Cytokines assay：Interleukin(IL)-1、IL-2、IL-12 等，以ELISA Test Kit测定。 结果与讨论(一)在抗癌活性分析方面：以人类前列腺肿瘤细胞(PC-3)及人类肝肿瘤细胞(HA22T)来作实验，结果发现生地黄及一至九蒸晒地黄对于PC-3（附件四图一）都没有任何毒杀能力；对于肝肿瘤细胞（附件四图二）的毒杀作用，则发现第二批五蒸晒之地黄、第三批一蒸晒地黄及重庆行生地黄有少许的肿瘤细胞毒杀作用，但作用太小，真实意义不大。此外，若细胞培养液中含有10%胎牛血清，则上述作用即消失，其解释原因为：1.可能是实验中有误差值，因实验值改变不大，故少许的误差即造成统计上没有意义了；2. 有可能地黄成分与血浆蛋白结合，使其作用消失 关注页面底部公众号，开通以下权限： 一、获得问题咨询权限。 二、获得工程师维修技术指导。 三、获得软件工程师在线指导 toupview,imageview,OLD-SG等软件技术支持。 四、请使用微信扫描首页底部官方账号！