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快速鉴定肠道杆菌科细菌及其他革兰氏阴性菌!

所属分类:显微镜百科 点击次数:341 发布日期:2022-06-20

网站网友点击量更高的文献目录排行榜: 点此链接 0 细菌快速鉴定方法 一、目的 应用迷你多项生化检测系统(miniaturized multi-test systems)快速鑑定细菌。 本试验以 API 20E 简易鑑定套组为例,鑑定肠道杆菌科细菌及其他革兰氏阴性菌。 二、原理 API 20E 套组有 20 个小管,内含特定的乾燥基质,可进行 23 种生化试验之判 读。各项生化试验依判读标准表判读及记录,再计算出 7-9 个数字之菌码(profile number),最后应用菌码索引(analytic profile index)查出该菌码所对应之细菌菌 名,即为待测细菌之菌种名称。 三、材料与设备 (一) 材料 1. 培养18-24小时之纯化Klebsiella pneumoniae 2. API 20E 细菌快速鑑定套组。 (二) 设备 1. 培养箱 四、方法与步骤 1. 将待测细菌进行氧化 (oxidase)试验,确定为阴性反应后再进行以下试 验。 2. 加 5 ml 水至培养托盘内之孔洞中,以保持盒内之湿度,并在盘上进行标示。 3. 取出 API 20E 快速鑑定套组并置入培养托盘内。 4. 加 5 ml 之无菌蒸馏水至无菌试管内。 5. 挑取 1-2 个纯化之菌落并悬浮至无菌蒸馏水中。 6. 于各试验孔之管中 (tube) 加满菌液。 7. 在 CIT, VP 及 GEL 试验孔之管头 (cupule) 加满菌液。 8. 在 ADH、LDC、ODC、H2S、URE 试验孔上加入无菌矿物油。 9. 盖上培养盖,于 37℃培养 18~24 小时后进行判读。 10. 先将不需加加入试剂即可判读之各项试验进行判读 (参考判读表) 并记 录。 1) 若 GLU 呈阳性及/或 3 个以上试验呈现阳性则在以下试验孔加入试剂后 判读: TDA 试验 – 在 TDA 试验孔加入一滴 TDA 试剂后即可判读; IND 试验 -- 在 IND 试验孔加入一滴 James 试剂后判读; VP 试验 -- VP 试验孔加入 VP1 及 VP2 试剂各一滴,10 分钟后判读; NO2 还原试验 -- 在 GLU 试验孔加入 NIT1 及 NIT2 试剂各一滴,2~3 分钟后判读。若为阴性反应 (黄色) 则加入 2-3 mg 锌粉,5 分钟后若仍 呈黄色则为阳性反应,若呈红色则为阴性反应。 2) 若 GLU 为阴性且其他反应呈阳性者少于2个,则将 API 套组再培养 24小时后如同上述加入各种试剂并进行判读。 关注页面底部公众号,开通以下权限: 一、获得问题咨询权限。 二、获得工程师维修技术指导。 三、获得软件工程师在线指导 toupview,imageview,OLD-SG等软件技术支持。 四、请使用微信扫描首页底部官方账号!

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