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怎样减少酵母菌悬浮液中酵母菌的密度!显微镜百科
所属分类:显微镜百科 点击次数:371 发布日期:2022-06-20
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(一)测量刚果红pH值之呈色反应,期目的在检定所用之指示剂本身并无问题,并了解刚果红由红色变蓝色所需的pH值。(二)根据实验指导说明,适用0.1 gm 刚果红粉末加入于 50 ml 的酵母菌溶液中,我们改用 1 gm 刚果红粉末加入于100 ml 的蒸馏水中,经过滤以除去未溶解之颗粒,再取滤液 10 ml 加入酵母菌溶液50ml 中,两者之刚果红浓度近似。(三)直接将刚果红粉末加入酵母菌溶液中,经草履虫摄食后所形成的食泡较大,呈现一团红色,无法清楚地分辨出食泡中一粒粒的酵母菌,而用刚果红溶液加入酵母菌溶液中则形成的食泡内之酵母菌一粒粒清晰可见。(四)若酵母菌液所含的酵母菌密度高时经草履虫摄食后所形成的时泡较大,反之则形成较小的食泡,食泡太大时不易由红色变蓝色。(五)用葡萄糖培养的酵母菌,后可闻到一股酸味(pH值=5.3)放置愈多天则酸味愈浓,且pH值愈低(三天后pH值=3.7)而只加水于酵母菌液者,则pH无大改变。(六)用甲基纤维使草履虫运动速度减慢便于观察,但当盖玻片盖下时酵母菌染色液容易向四方散开在甲基纤维素上,所以草履虫极不易摄食而形成食泡,且经约20分钟后即相继死亡。(缺水)但改用棉絮处理,不仅能将草履虫现在一定的小范围中且在一分钟即可看到形成之红色食泡,且草履虫不致缺水而死(可以在棉絮上加水使其渗透进去)故能观察较长的时间。(七)刚果红容易呈碱性,故不宜加太多数量于酵母菌溶液中,以免pH值太高,致使草履虫的食泡不易变色但亦不可太少,否则酵母菌染上的红色很澹,不易观察。(八)根据实验指导:将酵母菌溶液煮沸后,加入刚果红粉末再煮沸(或保持近于沸点)八分钟,在显微镜下观察,酵母菌成鲜红色,整个溶液之pH值虽未见升高,但可能酵母菌染上较多的刚果红,经草履虫摄食后形成食泡,期消化食所分泌之酸液不足以使刚果红由红色转变成蓝色,所以食泡不能变为蓝色,或只有小食泡变为紫色而已(此种情形与食泡过大而不能变色之情况一样)。(九)将刚果红酵母菌悬浮液加1/100 HCI 使其颜色近于暗红色时(pH=5.4)滴入草履虫培养液,放在显微镜下观察,发现草履虫皆死亡且虫体破裂,显然不宜用酸来降低酵母菌悬浮液之pH值。(十)用刚果红溶液及刚果红粉末来染酵母菌结果大致相同﹐但用粉末来染色﹐可能酵母菌液会带有颗粒﹐经草履虫摄食后较难变色﹐故不宜用粉末染色。
结论:由实验的结果及实验的过程所发现的问题可知﹐作草履虫的消化实验时﹐若要在时间内就能观察到时泡由红色变为蓝色﹐则在实验材料的准备上﹐必须做以下的改进:(一)设法降低酵母菌悬浮液的pH值:在培养酵母菌时不要只加清水﹐应在加入少量的葡萄糖及蛋白陈﹐作为其生长所需要的养分﹐并放置以上﹐当酵母菌进行代谢时放出二氧化碳或其它物质可以使酵母菌溶液之pH值较只加清水之酵母菌液低﹐有利于时泡颜色变化的观察。(二)减少酵母菌悬浮液中酵母菌之密度:将实验指导所记载的酵母菌用量减低到十分之一较为恰当( 100 ml 的水加入酵母菌2到3克)﹐以免草履虫一下子因摄食太多的酵母而形成大食泡﹐使得食泡内的pH值难以下降﹐导致食泡无法变色。
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