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神经坏死病毒带原之点带石斑鱼萤光显微镜下观察
所属分类：显微镜百科 点击次数：222 发布日期：2022-06-20
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本实验使用神经坏死病毒带原之点带石斑鱼，将其解剖取各组织以NNV PCR以及NNV Nested PCR检测，发现几乎各组织皆受到神经坏死病毒的感染。由于神经坏死病毒经由血液可以检测到，因此推测神经坏死病毒会率先感染血液裡的某些成分，而将病毒带往全身，造成全身性的感染。 首先将血液分成血清及血球组织，NNV Nested PCR从血清中侦测不出病毒的存在。将血球细胞分离，带原鱼隻白血球以标帜神经坏死病毒为单株抗体的免疫萤光方式于萤光显微镜下观察，发现不是全部的白血球皆受到神经坏死病毒的感染，且FITC萤光部位与细胞核的位置大致相同。 使用流式细胞仪，将白血球分选为淋巴球与嗜中性球两群后，以Wright玻片染色法确定，进行神经坏死病毒的免疫萤光染色，总萤光数从1.1%提升为 97.2%，淋巴球群从3.1%提升为55.9%，嗜中性球群从1.3%提升为64.5%，以FITC萤光标记可以得出两细胞群皆有受到病毒的感染。此两次细胞群的萤光强度比总萤光强度少了许多，推测遭受病毒感染更为严重的，为第三群次细胞群，将此细胞群分选后进行免疫萤光染色，萤光数从3.6%提升为 99.2%，依其细胞大小(FSC)和颗粒的複杂度(SSC)，推测为巨噬细胞。希望以此结果未来能依其白血球的表面抗原研发出相对应的拮抗物来阻断与神经坏死病毒的结合，以帮助石斑鱼体对抗病毒的侵袭。
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