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冷冻管解冻及培养基回温的温度须配合细胞适合生长的温度
所属分类：显微镜百科 点击次数：282 发布日期：2022-06-20
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活化培养的程序
打开水浴槽，确认温度
将冷冻管以水浴快速解冻(1~2分钟)，且必须完全解冻(避免细胞内冰晶反覆形成)
立 刻 将 解 冻 后 的 细 胞 液 加 至 flask(dish)中，然后缓慢加入新鲜培养基(避免渗透压差伤害)
置于培养箱培养，隔日再離心更换新鲜培养基(避免刚解冻后的细胞受到離心之物理伤害)
活化培养常見问题
1. 冷冻管解冻不完全。
2. 未避免渗透压差伤害。
3. 解冻完马上離心。(解冻完后的细胞生长势弱，離心使得细胞伤害更大，造成生长势无法回復。)
96.7.1~97.7.31期间 该類反应占总反应之35%
活化培养常見问题
冷冻管解冻及培养基回温的温度须配合细胞适合生长的温度，否则细胞容易生长不佳。曾发生以下桉例:
1. SF9昆虫细胞适合生长于低温(28 ℃)环境，然而客户解冻该细胞时却以37℃水温解冻，结果日后生长狀况不佳。2. 客户将细胞冷冻管置于56℃水浴下解冻。3. 冷藏于4℃下之培养基未加以回温即进行培养。
培养基相关问题
Q: 细胞培养资料单上建议于培养基中额外添加的Supplement是否可以乎略？
例如培养基中已含有L-Glutamine(L-Gln)，是否还要添加？1. L-Gln 浓度是否到达建议量。2. 培养基中的L-Gln 容易分解，因此放置过久的培养基必须再补充至足量的L-Gln。3. 细胞是否容易受到L-Gln不足而受影响。Raw264.7细胞容易因L-Gln 不足而分化。
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