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最近电泳跑出的条带老是这个样子,究竟是怎么回事呢

所属分类:显微镜百科 点击次数:191 发布日期:2022-07-02

大家好,这里是老上光显微镜知识课堂,在这里你可以学到所有关于显微镜知识,好的,请看下面文章:Zui近电泳出来的条带总是这个样子,用的是1%的琼脂糖凝胶,电泳液为1倍的TBE,电压120V,电流90mA,以前也是这样的条件,结果都挺好的,现在不知道是怎么回事,大家帮忙看看吧,谢谢啦!   是不是胶泥的时间不够就拔梳子了? 跑的是什么样品啊?多大? Zui好点个marker嘛   胶凝的很好了,应该不是这个问题吧   这是个actin,178bp,maker跑出来也是这样的。   可能是梳子比较厚 孔比较大 在加上PCR效果好 点样量多了 就成矩形状 你试试比较薄的梳子 少点点样品试试   不是用TAE吗?   178bp的你起码配个2%的胶来跑啦(2.5-3%胶都有人跑),点100bp或50bp的marker。 1%的胶适宜跑1-10kb的片段。   换琼脂糖了?要不就是缓冲液有问题,建议重新配一下缓冲液   上样量过大   上样量有点大,其他没啥问题吧。建议楼主把maker的图以及以前正常时的图也传上来看看哦。 可能是梳子比较厚 孔比较大 在加上PCR效果好 点样量多了 就成矩形状 你试试比较薄的梳子 少点点样品试试 好,O(∩_∩)O谢谢 不是用TAE吗? 我用的是TBE啦 178bp的你起码配个2%的胶来跑啦(2.5-3%胶都有人跑),点100bp或50bp的marker。 1%的胶适宜跑1-10kb的片段。 我试试看,O(∩_∩)O谢谢 换琼脂糖了?要不就是缓冲液有问题,建议重新配一下缓冲液 缓冲液都换过一遍了,还是这个样子 yzm869475747 这个染色的是啥呢 你这是吧样品  跑的都挤到一起了? 178bp的你起码配个2%的胶来跑啦(2.5-3%胶都有人跑),点100bp或50bp的marker。 1%的胶适宜跑1-10kb的片段。 想问下 是不是目的片段越小 用的胶浓度越大 我不太明白这个是为什么   难道溴酚蓝加少了或没混匀 片段越小需要用的胶浓度越大。因为胶浓度越大,形成的孔径就越小,这样才能将各种不同小片段的DNA分离开来,并达到一定的度。分子生物学实验手册有对应的表格。   不知道楼主的问题解决了没?如果解决了请和大家分享下原因哟,谢谢!   缓冲液换一下吧,估计用久了,离子浓度太高了 178bp的你起码配个2%的胶来跑啦(2.5-3%胶都有人跑),点100bp或50bp的marker。 1%的胶适宜跑1-10kb的片段。 试了一下,稍微好一点了,谢谢! 不知道楼主的问题解决了没?如果解决了请和大家分享下原因哟,谢谢! 好了,我换了3%的胶,电压降低到70V,缓冲液也统统重新配置跑出来就正常了   降低上样量,提高凝胶浓度   话说为什么是绿色的带啊?   网站网友点击量更高的文献目录排行榜: 点此链接 关注页面底部公众号,开通以下权限: 一、获得问题咨询权限。 二、获得工程师维修技术指导。 三、获得软件工程师在线指导 toupview,imageview,OLD-SG等软件技术支持。 四、请使用微信扫描首页底部官方账号!

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