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金相实验不锈钢的腐蚀液问题？

上海光学仪器厂：

一般不锈钢都是比较抗腐蚀饿，所以使用一般钢铁用的Nital就会腐蚀的效果不好甚至无法腐蚀。我们一般用王水，

并添加甘油来做缓冲剂(ex：1part 硝酸+3part盐酸+2part甘油)，

若为王水的话建议使用前再泡制，当天用完当天就捨弃。

另外也有使用盐酸+苦味酸+水来使用。不过要看你是哪种不锈钢而定。腐蚀液很多种，

抽提植物细胞的DNA方法？

材    料：

消毒过之dH2O, 4℃

液态氮

Extraction buffer

[配方]100mM Tris.Cl, pH8      100mM EDTA

250mM NaCl              100μg/ml proteinase K

10﹪(W/V)  N-lauroyl sracosine (SarKosyl)

100﹪及70﹪ethanol

TE buffer

7.5M ammonium acetate

方 法 一：

1.     取幼嫩植物组织10~30g, 以dH2O清洗, 晾乾.

2.     以液态氮将植物组织冷冻, 磨成粉.

3.     将粉装入离心管, 加入extraction buffer (每克植物组织加10ml extraction buffer), 充分溷合. 再加入适量之10﹪SarKosyl使最终浓度成为1﹪.

4.     置55℃, 1hr.

5.     离心10min, 6,000rpm, 4℃, 保留上清, 至另一离心管中.

6.     加入上清液0.6倍的isopropanol缓缓溷合. DNA应即析出,  否则置-20℃, 30min.

7.     离心8,000rpm, 4℃, 15min, 倒去上清. 再将DNA溶于适量TE中.

8.     接下来可用纯化DNA的方法纯化DNA (即25：24：1之Phenol/Chloroform/isoamyl alcohol)等量溷合, 离心2,800rpm, 10min, 上清液中为DNA.

9.     将上清液转至另一离心管中, 加入1/2倍体积量之7.5M ammonium acetate, 以及上清液量2倍之100﹪ethanol, 析出DNA. 再以2,800, 2min, 离心, 沉淀DNA, 倒去上清.

10.用70﹪ethanol洗DNA, 以去除盐分即phenol, 倒去酒精, 将DNA溶于适量TE中.

11.将DNA保存在-20℃.

用此法所得之DNA会含有粒腺体及叶绿体中的DNA, 要想得到纯植物DNA, 要用超高速离心机分离.

以此法所得之DNA量, 大约是每克植物10至40μg DNA.