用于观察某动物囊胚期细胞用专业光学显微镜
所属分类：新闻资讯 点击次数：3 发布日期：2026-04-20
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用于观察某动物囊胚期细胞用专业光学显微镜囊胚期胚胎显微注射仪器 显微注射操作台材料 1. 怀孕 3.5 天母鼠 2. 37℃、5% CO2 恒温培养箱 3. 胚胎干细胞培养液（ES培养液） 4. ES 细胞 5. PBS、Trypsin/EDTA、矿物油 6. 嘴吹式胚胎传送毛细玻璃管、显微注射针及显微胚胎固定针 7. 凹槽之载玻片 8. IM 实验步骤 1. 由怀孕 3.5 天母鼠子宫收集囊胚（方法见 以mitomycin C 处理纤维母细胞） 2. 将受精卵以口吹式毛细管放入含 ES 细胞培养液中，并覆盖矿物油避免蒸发， 再放入 37 ℃、5% CO2 培养箱中备用。 3. 于进行显微注射前约 1~2 小时，準备 ES 细胞。 4. 取 ES 细胞液一滴，滴于凹槽载玻片中央，并覆盖矿物油，避免蒸发。 5. 以毛细管吸取胚胎至玻片上 ES 细胞液中（一次约取 10 颗左右胚胎即可）。 6. 于显微注射操作台之高倍视野（400X）下， 以显微注射针仔细吸取饱满光亮之 ES 细胞约10~15颗。 7. 另以显微胚胎固定针吸附一颗囊胚。 8. 在高倍视野下，将显微注射针尖和被吸附之胚胎调整一致焦距，且肉眼可清晰观察。 9. 小心将显微注射针穿刺入囊胚空腔中，须注意不可由含内在细胞层（ICM, inner cell mass） 之一侧穿刺，且穿刺时尽量避免伤害滋养外胚层细胞。 10. 转动油压注射器，将 ES 细胞注入。 11. 抽出注射针，并释放完成注射之囊胚。 12. 重覆步骤 6，继续进行下一颗囊胚之注射
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