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外荧光显微镜计数被着色的细胞分析显微镜
所属分类：显微镜百科 点击次数：602 发布日期：2022-06-20
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外荧光显微镜计数被着色的细胞分析显微镜 直接外荧光过滤器技术 这种膜过滤技术被认为是基本方法的改良。直接外荧光过滤器技术(direct epifluorescent filtertechnique，DEFT)将荧光染色和荧光显微技术结合，是一种快速的食品微生物检测技术和方法。稀释的食品样品液通过5 p．m的尼龙过滤膜进行过滤，收集过滤液并用2 mI。去利通(Triton；译者注：非离子型表面活性剂的商品名)X一100和0．5 mL胰岛素进行处理。这种试剂用来溶解肉体细胞和防止阻塞过滤器。培养之后，过滤液通过0．6肛m孔径的聚碳酸酯过滤膜过滤，随后滤膜被11'f啶橙着色、干燥后，使用外荧光显微镜计数被着色的细胞，显微镜下每个区域细胞的平均数相加即得每克样品的细胞数。20～30 min得到结果，应用此方法测得肉和乳制品中的微生物数量约为6 000 cfu／g。 直接外荧光过滤技术应用于乳品中凹…，与APC法和DMC法所获得的结果类似，在5×103～5×108 cfu／mI。。在大约10 min内，这种方法能够检出乳品种活性革兰氏阴性菌和全部的革兰氏阳性菌no…。大约20 min内，可以计数热处理乳及乳制品中的微生物，检测下限细菌数少到5 700 cfu／mI。[9 8。。通过6个实验室协作研究，对比了DEFT(直接外荧光过滤器法)和APC(好氧平板计数法)，通常情况下两者的相关系数在0．9以上。但是DEFT(直接外荧光过滤器法)的重复性要比APC(好氧平板计数法)的重复性差1．5倍，而实验的再现性却仅是APC(好氧平板计数法)的3倍[9“。DEFT(直接外荧光过滤器)法可以计数过滤后的固体食品
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