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纤维素作为碳源培养基来筛选生长萄糖苷酶基因
所属分类：显微镜百科 点击次数：135 发布日期：2022-06-20
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纤维素作为碳源培养基来筛选生长萄糖苷酶基因 葡聚糖酶活性的检测卜落在可溶纤维素[CMC)的琼脂上土长，能合成相分泌内识葡聚糖酶蛇菌 落周围产生黄晕环(白斑处) 这项技术已经成功地应用于从链霉菌、梭状菌、嗜热厌氧菌、嗜热单胞菌、伊文杆菌、假单胞菌、纤维弧菌、瘤胃球菌、纤维单胞菌、纤维状细菌和杆菌等中分离出内切葡聚糖酶基因， 没有一种平板筛选方法可以很方便地检测克隆了外切葡聚糖酶基因的细胞，因此应用免疫学方法来检测表达外切葡聚糖酶的重组子。虽然需要与目的蛋白相对应的特异性抗体，但这种方法不需要分泌蛋白就可以检测出来。先将重组细胞原位裂解．如暴露于氯仿蒸气中，再将细胞质蛋白转入尼龙膜或硝化纤维膜以便进行免疫测试。检测中，复制平板宋保证细胞进一步利用和繁殖。 将子葡萄糖苷酶的基因库转化大肠杆菌，分离原核生物的庐葡萄糖苷酶基因。通过纤维素作为惟一碳源的基本培养基来筛选生长的转化子，表达子葡萄糖苷酶的克隆利用显色底物来鉴定
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