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纤溶性微生物分解纤维素的过程缓慢且不完全
所属分类：显微镜百科 点击次数：209 发布日期：2022-06-20
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纤溶性微生物分解纤维素的过程缓慢且不完全 纤溶性微生物分解纤维素的过程缓慢且不完全，因此有必要通过基因工程手段来制造一种具有更有效的纤维素酶活性的微生物：为此．从原核生物和真核生物中分离出编码纤维素酶活性中具有不同酶功能的基因。 通过下列简单而有效的技术可以克隆原核生物内切葡聚糖酶基因。 ①在大肠杆菌中构建纤溶性原核生物的DNA基因库，宿主菌在加有选择抗生素固体培养基上过夜培养。 ②菌落在含有羧甲基纤维素(CMC．一种可溶的纤维素衍生物)的琼脂上生长。平板37℃培养几个小时内，在合成和分泌内切葡聚糖酶菌落近处的羧甲基纤维素分子将被部分消化。合成非分泌型内切葡聚糖的转化子不能分解底物，这是因为这些底物体积太大，不能进入细胞。 ③消化的CMC区域先用对细菌无毒的刚果红染料浸泡，冉用NaCl冲洗。刚果红选择性吸附于高分子量的纤维素链中，显示出红色；相对而言．它时小分子量的多糖黏附性差而显黄色。NaCl处理使染料的结合更加稳定，如果细菌菌落产生一种分泌型的内切葡聚糖酶，它的周围会产生一个黄晕环；没有被降解的CMC作为背景．呈红色
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